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柱后衍生技术在食品标准中的应用
在HPLC分析中, 常用的检测器为UV/VIS或荧光检测器,但是很多物质因不具有发色基团或不能产生荧光,或者很难与背景区分以致不能被检测。柱后衍生技术, 地解决了这一问题。它能够将一些因上述原因不能被分析的样品通过化学反应,转化为带有发色基团或能够产生荧光的可分析化合物,在某些情况下可以使检测灵敏度提高几个数量级,这使得HPLC应用得以被广泛地延伸。
衍生化技术分为柱前衍生和柱后衍生两类。而柱后衍生化技术是常用的一种在线处理技术。该技术为介质中痕量药物的分析和弱紫外吸收物质的分析开辟了广阔的应用前景,在食品中残留农药检测、氨基酸分析、无机离子分析、生物毒素检测、兽药分析及体内药物分析等领域有着广泛的应用。与柱后衍生相比,柱前衍生因存在反应时间长、操作步骤烦琐、重现性差、分析测定不易连续化和自动化等不足而逐渐被柱后衍生所取代。在近年来颁布的食品标准中,柱后衍生的应用也呈现逐年递增的趋势。
泰特仪器柱后衍生系统TW-PCD2000是将HPLC的洗脱液与衍生试剂混合,混合溶液在一定的时间内通过反应器完成反应。如果反应速度慢,可通过反应器加热加快速度。有些反应则需要加入两种溶剂。 后混合液进入检测器使衍生反应生成物被检测。一个完善的柱后衍生系统由计量泵、脉冲阻尼器、加热线圈、安全装置等部分组成,以确保提供安全、可靠的数据。
下面列举了若干柱后衍生法在食品标准当中的应用:
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标准号 |
被测物质 |
衍生化试剂 |
衍生温度 (℃) |
检测方法 |
检测器 |
检测限 (参考标准) |
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SN/T 3138-2012 |
出口面制品中溴酸盐 |
氢碘酸 |
80 |
柱后衍生离子色谱法 |
紫外 |
0.1 mg/kg |
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SN/T 0122-2011 |
进出口肉及肉制品中甲萘威 |
水解:NaOH溶液 衍生:OPA溶液 |
水解:100 衍生:室温 |
柱后衍生反相色谱法(C18) |
荧光 |
0.005 mg/kg |
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GB 5413.26-2010 |
婴幼儿食品和乳品中牛磺酸的测定 |
OPA溶液 |
室温 |
柱后衍生钠离子色谱法 |
荧光 |
0.5 mg/100g |
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GB/T 23212-2008 |
牛奶和奶粉中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M2 |
过溴化溴化吡啶 |
35 |
柱后衍生反相色谱法(C18) |
荧光 |
0.001~0.05 μg/kg |
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农业部1025号公告-1-2008 |
牛奶中氨基苷类多残留 |
OPA 2-巯基乙醇 |
45 |
柱后衍生阳离子交换色谱法 |
荧光 |
10~25 μg/L |
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NY/T 761-2008 |
蔬菜和水果中氨基甲酸酯类农药多残留 |
水解:NaOH溶液 衍生:OPA溶液 |
水解:100 衍生:室温 |
柱后衍生反相色谱法(C18) |
荧光 |
0.008~0.02 mg/kg |
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GB/T 21164-2007 |
蜂王浆中链霉素、双氢链霉素残留 |
衍生剂1:1,2-萘醌-4-磺酸钠 衍生剂2:NaOH |
50 |
柱后衍生反相色谱法(C8) |
荧光 |
0.02、0.08 mg/kg |
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SN/T 1736-2006 |
进出口蜂蜜中黄曲霉毒素 |
碘 |
70 |
柱后衍生反相色谱法(C18) |
荧光 |
0.5 μg/kg |
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SN/T 1775-2006 |
进出口蜂王浆及蜂王浆冻干粉中链霉素残留量 |
衍生剂1:1,2-萘醌-4-磺酸钠 衍生剂2:NaOH |
室温 |
柱后衍生反相色谱法(C18) |
荧光 |
0.01、0.02 mg/kg |
柱后衍生TW-PCD2000除应用在以上在食品标准当中外,还在其它多种食品中的氨基酸,黄酮类,萜类,氨基糖苷类、磺胺类、四环素类、聚醚类等抗生素,氨基甲酸酯、除草剂等农药残留,以及黄曲霉毒素、河豚毒素、生物性贝类毒素等生物毒素等食品分析中有着广泛应用。相对于色谱-质谱联用技术,它的应用成本较低,对分析条件要求不是很严格,因此作为常规液相色谱分析法的重要补充,其发展和应用对解决食品分析中的若干问题有着相当重要的现实意义。
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